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生物潔凈安全柜是當今微生物實驗室的必需品，尤其是那些需要操作人員采取防護措施的場合。如醫療、制藥、科研等，為細菌培養提供無菌、無塵、安全的工作環境。為了讓更多的用戶充分了解產品，接下來為您解析生物安全柜的測試方法。
1. 一般要求
1.1 測試條件
“被測生物安全柜置于正常工作條件下"是指：生物安全柜在說明書規定的條件下工作。
1.2 測試訂單
試驗應按本標準 6.3 規定的順序進行。
1.3 測試環境
生物安全柜的性能測試應在符合以下環境要求的門口有正壓緩沖室的實驗室進行：
a) 溫度：15~30℃；
b) 相對濕度：不高 70%；
c) 清潔度：自潔狀態下可達5級。
1.4 電源
1.4.1 電源電壓偏差：±3V；
1.4.2 電源頻率偏差：±2Hz。
2. 測試設備
2.1 檢測設備應定期送至具有檢定（檢驗、校準）資質的計量檢測機構進行檢測，有效使用期限不超過一年。測試儀器經檢定校準后方可投入使用。
2.2 生物安全柜的測試需要以下設備：
a) 氣溶膠發生器
b) 粒子計數器（粒度分辨率從0.3μm或0.1μm開始）；
c) 噴霧效率≥88%的噴霧器，滿足本標準附錄A的要求；
d) 模擬干涉圓柱體（簡稱圓柱體），外徑為63mm，兩端封閉，長度由生物安全柜內部尺寸確定，材質為不銹鋼或鋁；
f) 沖擊采樣器（毛細管直徑1.0mm，采樣量12.5l/min）；
g) 間隙采樣器（采樣量為30l/min）；
f) Φ90培養皿，培養基應含有營養瓊脂、大豆瓊脂或其他適合微生物生長的培養基，不含抑制劑或添加劑；
g) 熱球風速計或氣流測試儀，測量精度為±0.01m/s；
h) 微壓表，精度等級不低于1.5級；
i) 干球溫度計，小單位分度為1℃；
j）聲級計，測量范圍50~100dB，“A"計權方式；
k) 照度計，可滿足1000lx以下照度的測量；
l) 振動計，靈敏度小，振幅有效值達到2.5μm；
m) 接觸電流測試儀；
n) 微電阻測試儀；
o) 耐壓測試儀，輸出交流有效值1500V，或直流2121V電壓，持續時間可在1~60s范圍內設置。
三、測試方法
3.1 箱體檢漏
去除被測生物安全柜的部分保護板或裝飾面板，露出箱體，將生物安全柜箱體形成一個獨立的封閉系統。
將機柜加壓至 500Pa 并持續保持此狀態。將25g/L的肥皂液噴灑在箱體的焊縫、墊片、貫穿部位和密封部位，尋找泄漏點。
注：可用中性洗滌劑稀釋10倍，作為皂液使用。
3.2 過濾器泄漏檢測
3.2.1 排氣過濾器泄漏檢測
選擇以下方法之一進行排氣過濾器泄漏檢測：
a) 只開排風扇，不開鼓風機，以保證生物安全柜吸入普通環境空氣，粉塵濃度不小于10000顆粒/L（≥0.5μm）。用粒子計數器的取樣口在排氣過濾器出風口面上方20mm處及框體間隙處進行檢漏掃描。掃描移動速度小于等于5-20mm/s，路徑應重疊。
b) 氣溶膠發生器在排氣過濾器的上游，通過帶螺紋塞的穿透將氣溶膠引入待測生物安全柜的靜壓箱，氣溶膠靠近過濾器上游以測量氣溶膠濃度，至少有 3 個測量點，一個在中心，一個在距離兩側 50 mm 處。使用粒子計數器的采樣口在排氣過濾器出風口表面上方20mm處進行檢漏掃描。掃描移動速度≤5~20mm/s，路徑應重疊。
如果檢漏標準是根據0.1μm來評估的，則只有方法b)適用。
檢出粒子數應符合表4第2項的要求。
3.2.2 送風過濾器泄漏檢測
環境粉塵濃度≥10000個顆粒/L（≥0.5μm），送風面以下20mm處掃查檢漏，掃查移動速度≤5~20mm/s，路線應重疊。
檢出粒子數應符合表4第2項的要求。
3.3 清潔度
被測生物安全柜在正常工作條件下放置30分鐘。
清潔度測量邊界距離內表面或前窗 150mm。
粒子計數器的采樣口置于工作臺上方200mm高處，測量點布置如圖1所示。
清潔度應符合表4中第3項的要求。
3.4 人員安全
3.4.1 儀器及采樣點布置（圖2）：
a) 將裝有55ml枯草芽孢桿菌懸浮液（5～8×108/ml）的噴霧器放在安全柜的左右內壁上為水平中心，水平噴射軸應距工作臺面向上350mm并平行到工作臺面。噴霧器的噴嘴應放置在距前窗內側 100mm 處并面向前窗。
b) 氣缸置于安全柜的中央，中心軸位于工作臺上方70mm處。筒體一端緊靠安全柜后壁，另一端應伸出安全柜前窗至少150mm。
c) 氣瓶周圍有4個沖擊采樣器，采樣口位于安全柜前窗外63mm處。兩個沖擊取樣器的取樣口軸線相距150mm，與筒體頂部水平線相切。另兩臺沖擊取樣器的取樣口軸線相距50mm，與筒體底部水平線在同一水平線上。還有兩個沖擊取樣器，其取樣口的水平面位于工作臺上方360mm處，兩個取樣口的垂直軸距安全柜前窗外50mm處，分別位于150mm處在安全柜中心線的每一側。
d) 設置兩個狹縫取樣器，取樣口所在的水平面為工作面，縱軸距安全柜前端外壁150mm，兩側距內壁200mm .
e) 作為陽性對照，在筒體中心軸下方、前窗進風格柵上方或下方10mm處放置帶支撐架的瓊脂培養皿，使其對進入格柵的氣流干擾小.
3.4.2 抽樣程序
緩沖間正常運行，開啟自潔系統，停止自潔系統直至環境潔凈度達到5級，生物安全柜運行30分鐘后開始測試。
測試時長為30min，采樣流程如表5所示：
表 5 取樣程序
3.4.3 細菌培養
使用直徑為47mm，孔徑為0.22μm的膜過濾器該薄片過濾了撞擊器采樣的所有液體。在無菌狀態下，取下過濾器并將其放入具有合適培養基的培養皿中。裝有過濾器的培養皿、帶有兩個狹縫取樣裝置的培養皿和對照培養皿在37℃培養24至28小時后進行測試。如果培養皿為陰性，則在 44~48h 后重新孵育并讀取。
對照菜應為陽性。當對照培養皿中含有≥300 個枯草芽孢桿菌菌落時，稱為陽性。
按6.3.4.2和6.3.4.3的程序進行3次試驗。
6.3.4.4 新產品或有較大改動設計的生物安全柜，應按6.3.4.2和6.3.4.3的程序在下列條件下重復試驗：
a) 吸入口風速偏離標準風速-0.05±0.015 m/s，供給風速偏離標準風速+0.05±0.015m/s；
b) 吸入風速偏離標準風速–0.05±0.01m/s，送風速度偏離標準風速–0.05±0.01m/s。
3.4.5 試驗結束后，對環境中的所有表面進行擦拭消毒。
3.5 受試樣品的安全性
3.5.1 儀器及采樣點布置：
a) 將裝有55ml孢子懸液（5～8×106/ml）的噴霧器安全放置在機柜的水平中心，水平噴霧軸應距工作臺面200mm以上，并與工作臺面平行。噴霧器的噴嘴應放置在距前窗外側 100mm 處并面向前窗。
b) 氣缸置于安全柜的中央，中心軸位于工作臺上方70mm處。筒體一端緊靠安全柜后壁，另一端應伸出安全柜前窗至少150mm。
c) 將瓊脂培養皿鋪在工作臺面上，然后將培養皿蓋一一打開。
d) 作為陽性對照，在圓柱體中心軸下方放置一個帶支撐架的瓊脂培養皿，位于前窗進氣格柵上方或下方10mm處，使其對氣流的干擾很小進入格柵。
3.5.2 抽樣程序
緩沖間正常運行，開啟自潔系統，待環境潔凈度達到5級后，停止自潔系統，生物安全柜運行30分鐘后開始測試。
噴涂機運行 5 分鐘。噴霧器停止 5 分鐘后，蓋上瓊脂培養皿。
3.5.3 細菌培養
培養皿在37℃培養24~28h后進行檢測。如果培養皿為陰性，則在 44~48h 后重新孵育并讀取。
37℃培養24~28h后，對照培養皿應呈陽性。當對照培養皿中含有≥300 個枯草芽孢桿菌菌落時，稱為陽性。
應按6.3.5.2和6.3.5.3的程序進行3次試驗。
3.5.4 新產品或有較大改動設計的生物安全柜，按6.3.5.2和6.3.5.3的程序在下列條件下重復試驗：
a) 吸入口風速偏離標準風速-0.05±0.015 m/s，供給風速偏離標準風速+0.05±0.015m/s；
b) 吸入風速偏離標準風速–0.05±0.01m/s，送風速度偏離標準風速–0.05±0.01m/s。
3.5.5 試驗結束后，對環境中的所有表面進行擦拭消毒。
3.6 交叉感染
3.6.1 設備及采樣點布置（圖5）：
a) 裝有55ml枯草芽孢桿菌懸浮液（5～8×104/ml）的噴霧器，水平噴霧軸在工作臺頂部76～127mm，與工作臺面平行。噴霧器背面靠近左（右）內壁的氣流接口，噴嘴正對著右（左）內壁。
b) 瓊脂培養皿按以下方法排列：
噴頭下方放置兩個對照培養皿，距右（左）內壁360mm處布置一排培養皿。安排一到兩排培養皿。
3.6.2 抽樣程序
緩沖間正常運行，開啟自潔系統，停止自潔系統直至環境潔凈度達到5級，生物安全柜運行30分鐘后開始測試。
噴涂機運行 5 分鐘。噴霧器停止 15 分鐘后，蓋上瓊脂培養皿。
3.6.3 細菌培養
培養皿在37℃培養24~28h后進行檢測。如果培養皿為陰性，則在 44~48h 后重新孵育并讀取。
對照培養皿在37℃培養24~28h后應呈陽性。當對照培養皿中含有≥300 個枯草芽孢桿菌菌落時，稱為陽性。
應按 3.6.2 和 3.6.3 三項試驗的程序。
3.6.4 新產品或有較大改動設計的生物安全柜，按6.3.6.2和6.3.6.3的程序在下列條件下重復試驗：
a) 吸入口風速偏離標準風速-0.05±0.015 m/s，供給風速偏離標準風速+0.05±0.015m/s；
b) 標準風速為–0.05±0.01m/s，供給風速偏離標準風速–0.05±0.01m/s。
3.6.5 試驗結束后，對環境中的所有表面進行擦拭消毒。
3.7 供給風速
垂直氣流的平均風速是在工作臺面上方300mm的平面區域內測量的，該區域距離內墻板和前窗100mm。
測點服從行列150m的網格分布。如果去除測量邊界后凈尺寸不等于15的整數倍，則允許校正測量點之間的距離，但每列至少測量3個點，至少測量7個點每一行。
送風速度是每個測量點讀數的算術平均值。
